高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性
點(diǎn)擊次數(shù):1898 更新時(shí)間:2017-06-20
高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性
高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography,簡稱HSCCC),于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)的液液分配色譜技術(shù),與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體,因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時(shí)它也具有適用范圍廣、快速、進(jìn)樣量大、費(fèi)用低、回收率高等優(yōu)點(diǎn)。因此,己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用,尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視。
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法,它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí),另一相在螺旋管里的保留值大約50%,但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小,使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí),兩相的分布發(fā)生變化。當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí),兩相就會(huì)沿螺旋管長度*分開,其中一相全部占據(jù)首端的一段,我們稱這一相為首端相,另一段全部占據(jù)尾端的一段,稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征,在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下,如果從尾端送入首端相,它將穿過尾端相而移向首端,同樣,如果從首端相送入尾相,它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。分離時(shí),在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相),然后從合適的一端泵入移動(dòng)相,讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉(zhuǎn)速越快,固定相保留越多,分離效果越好,且大大地提高了分離速度,故稱高速逆流色譜。
簡述高速逆流色譜儀的產(chǎn)品優(yōu)勢:
1、由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的,因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離,在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體,因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失,特別適用于分離極性物質(zhì)。
2、操作簡便,容易掌握:高速逆流色譜儀操作簡單,對樣品的預(yù)處理要求低,一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析。
3、回收率高:不需要固相載體,消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失,理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件,一般都有很高的回收率。
4、重現(xiàn)性好:如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用,酸堿性也不強(qiáng),即使多次進(jìn)樣,其分離過程都保持很穩(wěn)定,而且重現(xiàn)性相當(dāng)好。